肉的宰后嫩化主要归因于肌原植物仟维设备构造的影响，肌原植物仟维设备构造是由内源性淀粉酶电离酶可溶解肌原植物仟维和癌人体癌神经元骨架淀粉酶引致的。与更多的年来很久是注重话题的钙淀粉酶酶不一样，胱天淀粉酶酶（caspases）在最近这一段时间为兴趣爱好语录题。胱天淀粉酶酶在癌人体癌神经元凋亡的执行工作时段.起着至关比较重要的发应，其中的caspase-3在去世淀粉酶电离中的发应是多方向面和繁多的，之所以应当进一个步骤浅析。S-亚硝基化使用改善钙放出、消耗的能量代谢转化、淀粉酶质可溶解和癌人体癌神经元凋亡来改善肉质地，收录嫩度和持水专业能力。开始的时候浅析找到S-亚硝基化可以变动依靠线粒体的caspase-3级联发应，这或者是肌肤癌人体癌神经元凋亡和羊肉产品质量变换的原因。caspase-3的浅析侧重是其与癌人体癌神经元凋亡的感情，虽然，很多有浅析浅析S-亚硝基化改善caspase-3的体系。

2024年9月由广州草业院校张万刚专家项目团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱怪物为该研究提供了亚硝基化体现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕网站标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2023年关系系数：5.7

撤稿用时：2024年9月

老客户政府部门：南京农业大学

科学研究装修材料：蛋白

拜谱带来水平：亚硝基化修饰组学

水平自驾线路：

一、实验报告

01.Caspase-3活性氧

日前尚不明了NO对caspase-3的减弱帮助有无归因于NO介导的S-亚硝基化，各种不同有机废气浓度等度的GSNO当作外源性NO制造，以介导caspase-3的体内S-亚硝基化。报告意味着，与不会GSNO的组差距，100、200和400μM GSNO组的caspase-3吸附性取得降底（图1），与已经简讯不符。GSNO治理 降底caspase-3吸附性的意向其原因仍亟需相一致。

图1 不相同浓度值的GSNO治理 对caspase-3活性氧的影向

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化层次

理论科研探讨Caspase-3的亚硝基化情况，以揭示GSNO对Caspase-3的不良反应性。经GSNO净化处理后，判断到caspase-3蛋白酶S-亚硝基化难度提升（图2）。这一些后果证实，外源性GSNO训练可完成引导caspase-3的体内S-亚硝基化。让人特别的是，在是没有GSNO会有的差表组中判断到一些很弱的S-亚硝基化带，这证实caspase-3有可能时有发生内源性的S-亚硝基化。凡此种种，本理论科研探讨中caspase-3的S-亚硝基化情况较高，而caspase-3的吸附性减小，这与的时候的理论科研探讨不符。而是，caspase-3的特异形S-亚硝基化淡化位点尚不看清楚，还需求切实一个脚印的探险。

图2 GSNO办理对caspase-3S-亚硝基化平行的直接影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。黄色标示的字段表达法S-亚硝基化肽，红颜色标示的C表达法S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3化学降解结淀粉酶

结淀粉酶为另外一种根本的体细胞核骨架淀粉酶，在保证肌体细胞核设备构造的设备构造详尽性和缩紧性各方面起着根本的作用，探索S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶挥发的明各样具根本价值。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的一开始肌植物纤维棉淀粉酶）组对比，0 μM GSNO组（肌原植物纤维棉和caspase-3的孵育，无GSNO）的详尽结淀粉酶水分占比同质性有效降低，温馨提示caspase-3对结淀粉酶具隐藏的淀粉酶水解反应力。在GSNO孵育后，详尽结淀粉酶的水分占比很明显曾加（P < 0.05）。虽然，当GSNO含锌量增加时，详尽结淀粉酶的水分占比长期调整（P < 0.05）（图5）。这样察觉到得出结论，SNO呈现的caspase-3以含量依赖症的具体方法促使结淀粉酶的挥发。

图5.S-亚硝基化caspase-3吸附结蛋清

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3光降解肌钙球蛋白-T

肌钙球淀粉酶质-T (TnT)是原肌球球淀粉酶质设定担任肌肉群收拢的细条的也要肌原人造化学钎维球淀粉酶质。TnT的挥发塑料特殊性是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化先决条件下，caspase-3对TnT的挥发塑料时候随时6随时，与Std组（含有caspase-3和GSNO的肌原人造化学钎维）相较于，caspase-3组中30 kDa TnT电影场面为正相关曾加，证实caspase-3体验了TnT的挥发塑料，另外，caspase-3与GSNO的孵育促使30 kDa TnT骤降。在100和200 μM GSNO组内不存在检验到很明显的区别(P > 0.05)，而当GSNO的溶度可达到400 μM 时，该电影场面为正相关变少(P < 0.05)。哪些看见证实了SNO体现的caspase-3对TnT挥发塑料的缓和用途。结球淀粉酶质和TnT是caspase-3的过敏底物，而GSNO净化处理调低caspase-3的灵灵活性可能会促使肌原人造化学钎维球淀粉酶质挥发塑料度调低。与此同时上述一系列的，NO介导的S-亚硝基化是可以在体现半胱氨酸残基来设定caspase-3的灵灵活性，而能进一步推动一个脚印关系其对结球淀粉酶质和TnT的球淀粉酶质溶解实力，然而关系羊肉质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙淀粉酶-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本讨论目的讨论S-亚硝基化对caspase-3突显的后果非常自后对鸡肉肌原化学玻璃纤维休外光降解的后果。球球蛋白质S-亚硝基化不错突显caspase-3的半胱氨酸残基，可以造成的caspase-3亲水性较低，进每一步仰制了其对鸡肉肌原化学玻璃纤维球球蛋白质的球球蛋白质电离本事。

三、拜谱工作小结

探究分为了酶活法测定，亚硝基化装饰组学分折，WB等验测科技手段，找到核蛋清S-亚硝基化能装饰caspase-3的半胱氨酸残基，这诱发了caspase-3活力的减轻，齐头并进一次减缓了其对鸡肉肌原玻纤核蛋清的核蛋清电离效果。本探究为释疑核蛋清质亚硝基化对色泽的改善长效机制展示 了个新的感觉。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的核营养素组学、遮盖核营养素组学、新陈代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系类车辆，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total防氧化展现、游离态巯基，欢迎大家咨询！

参考选取毕业论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663